磷酸化是细胞内最常见和最重要的蛋白质翻译后修饰之一。蛋白质的磷酸化和去磷酸化作为一种“分子开关”,通过影响蛋白质的结构、定位和功能,在细胞的信号转导、转录翻译、代谢和发育等生命过程中发挥着重要作用。在真核细胞中,大约 1/3 的蛋白质会被磷酸化。
尽管磷酸化蛋白的数目相对较多,但磷酸化多肽在总酶切多肽中的占比并不高,据推测可能不足 5%,大量非磷酸化蛋白的存在会对磷酸化蛋白的鉴定造成一定的挑战。近年来不断有各种磷酸化富集方法的报道,使得磷酸化蛋白质和磷酸化位点的鉴定数目有了大幅度的提高,目前最常用的是亲和色谱法,包括IMAC,Fe-NTA和TiO2等。
青莲百奥推出了基于Ti-IMAC材料的磷酸化肽段富集试剂盒,利用金属离子Ti与磷酸基团之间的特异性相互作用富集磷酸化肽段,富集能力是常规固定化金属离子亲和色谱法(Fe3+-IMAC)的3倍以上,与TiO2相比可以提高约30%,富集特异性可达95% [1]。
青莲百奥磷酸化肽段富集试剂盒——PEB2
测试使用100ug Hela细胞肽段,在DIA的数据采集模式下使用QE-HFX进行质谱检测,检测梯度60min。最终检测到24,000+磷酸化位点,22,000+磷酸化肽段和3,600+磷酸化蛋白。其中,多位点磷酸化蛋白数量占比近40%。
高效的富集能力:26000+位点
稳定的富集能力:富集效率维持在90%以上
多位点磷酸化肽比例高
相比于常规的实验流程,磷酸化肽段富集试剂盒PEB可以良好适配自动化流程。结合青莲百奥最新发布的智慧实验室——Magic Show,覆盖从蛋白质提取、质量控制、低丰度富集、还原烷基化、酶解脱盐到翻译后修饰富集的样本前处理全流程。实现磷酸化肽段的高效、自动化富集,进一步降低人为误差,缩短实验流程!
青莲百奥修饰蛋白组学产品线升级,不仅精心打磨了经典修饰产品线(如磷酸化、糖基化、泛素化等),同时开拓了一系列新型修饰产品线(如乳酸化、酰化修饰、氧化还原等)。现凭借先进的高分辨率、高灵敏度质谱技术,积累了丰富的修饰组学研究经验,提供深入的生物信息学分析报告,为科研工作的深入探索和成果的有效转化提供强有力的支持。欢迎咨询!
参考文献:
Yao Y, Dong J, Dong M, et al. An immobilized titanium (IV) ion affinity chromatography adsorbent for solid phase extraction of phosphopeptides for phosphoproteome analysis. J Chromatogr A. 2017;1498:22-28. doi:10.1016/j.chroma.2017.03.026